米醋中蜡状芽孢杆菌DNA提取及其ERIC-PCR体系建立
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- 2021-04-27
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以蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)为试验材料,比较细菌基因组DNA的提取方法。将ERIC-PCR应用于醋液分离菌的研究,对此反应体系的主要因素进行优化,最终建立了适合于此菌种的ERIC-PCR体系。采用改良的传统细菌基因组DNA提取方法,所提取的DNA质量较高,能够满足ERIC-PCR反应的需要。反应体系:25μL反应体积10×扩增缓冲液(含Mg2+)2.5μL,20pmol/μL ERIC-PCR引物E11μL,20pmol/μL ERIC-PCR引物E21μL,DNA模板2μL,2.5mmol/LdNTPs混合液2.0μL,taq聚合酶1.1μL,双蒸水补齐;PCR反应程序为:94℃变性3min,1个循环;94℃变性30s,55℃退火40s,72℃延伸1min,30个循环;72℃延伸4min。
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