假俭草ISSR-PCR反应体系的建立与优化
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- 2021-04-28
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以假俭草为材料,对影响ISSR-PCR扩增结果的因素进行了探讨,建立了适合假俭草ISSR-PCR分析的最佳反应体系。表明在20μL总体积中,包含40 ng模板DNA、ISSR引物0.4μmol/L、dNTPs 0.1 mmol/L、Mg2+1.0 mmol/L0、.1 UTaqDNA聚合酶和10×buffer 2.0μL。扩增条件为:94℃预变性5 min;94℃变性45 s,55℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,35个循环;72℃延伸7 min。
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