大青叶SRAP-PCR反应体系的建立与优化研究
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- 2021-09-10
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为了建立并优化大青叶SRAP-PCR扩增体系。以大青叶基因组DNA为模板,通过正交试验设计,从Mg2+、d NTP、引物、Taq DNA聚合酶和模板DNA 5种因素5个水平对大青叶SRAP-PCR反应体系进行优化。建立的大青叶SRAP-PCR最佳反应体系为25μL反应体系中含1.5 mmol·L-1Mg2+、0.15 mmol·L-1d NTPs、0.60μmol·L-1引物、2.0 U Taq DNA聚合酶和26 ng DNA模板。在这一体系下对不同大青叶材料的PCR扩增和在不同引物组合下扩增都证明该体系稳定可靠适合于大青叶SRAP分子标记。这一体系的建立为今后利用SRAPPCR分子标记技术开展大青叶分子遗传学研究奠定了基础。
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