正交设计优化大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系
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- 2021-09-10
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【目的】优化大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系,为大旗瓣凤仙遗传多样性分析提供技术参考。【方法】利用正交试验设计对大旗瓣凤仙ISSR-PCR反应体系的5个因素(Mg2+、dNTP、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA)4水平进行优化分析,并在此基础上对PCR反应过程中的退火温度进行筛选。【结果】建立了大旗瓣凤仙ISSR-PCR的优化反应体系,即在25.0μL反应体系中含1×PCR Buffer、Mg2+1.5 mmol/L、dNTP 0.25 mmol/L、引物0.8μmol/L、Taq DNA聚合酶0.75~1.00 U、模板DNA 100 ng。通过该体系可以筛选出6条对大旗瓣凤仙种群扩增效果较好的引物。【结论】优化的ISSR-PCR反应体系具有较高的稳定性,可用于大旗瓣凤仙及凤仙属植物种群的ISSR遗传多样性分析。
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擅长:
市政 园林 给排水 暖通
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