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- 2020-12-27
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目的 抗胶质瘤单克隆抗体建株初期效价为 1∶10 5,经长期传代培养后效价下降至低于 1∶10 4 ,为探索其分子机制并将其改造为有活性的单链抗体 ,为构建靶向基因转移载体奠定基础。方法 通过RT PCR克隆该单抗可变区基因 ,发现轻链可变区CDR1区出现一终止密码子 ,为此利用PCR定点诱变技术将其突变为该亚组相应的氨基酸 ,进一步构建单链抗体表达载体 ,并在大肠杆菌表达。结果 改造后的单链抗体能高效表达 ,Westernblot和免疫荧光证实能与相应的膜抗原特异结合。结论 成功地改造并构建单链抗体 ,可用于胶质瘤靶向基因治疗。
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