幼畜腹泻双价基因工程疫苗(K88、K99)的高密度发酵生产工艺及抗原过量表达
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- 2021-08-06
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本文报道了幼畜腹泻双价基因工程疫苗(K88,K99)的高密度发酵生产工艺和抗原基因的过量表达研究结果。采用New Brunswick公司发酵罐,主要发酵参数为搅拌速度1000rpm,通气量为18L/min,溶氧为25%,pH6.5,罐压为48.3kPa,温度37℃,发酵时间为20h。菌体浓度为A_(600)nm40以上,K88、K99抗原效价分别达2~(12)水平。发酵过程中发现表达的抗原除装配细菌伞毛之外,过量表达的抗原以相当于伞毛中抗原浓度游离存在于溶液中。含双价疫苗基因的表达型质粒的稳定性在发酵20h后保持在70%。本文结果表明利用小型发酵罐(10L发酵液)每次可制备10000支疫苗,完全可以满足对幼畜腹泻基因工程疫苗的大量需要。
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