100 积分
50
评分
4.7 积分- 详情
- 2020-12-27
- 简介
pdf
- 635KB
- 页数 9P
- 阅读 70
- 下载 38
目的利用核糖体工程技术,改造放线菌次级代谢功能,筛选获得抗肿瘤活性突变株,并对突变株新产活性产物进行研究。方法以海洋来源无活性放线菌野生株HLF-39和HLF-43为出发菌,通过单菌落挑选与平板划线培养,分离纯化链霉素抗性突变株,通过摇床液态发酵和发酵提取物乙酸乙酯萃取样品的抗肿瘤活性筛选,获得抗肿瘤活性突变株;采用活性跟踪与微量预试先导-放大实验制备组合的实验模式,与原始菌样品对照比较,在快速确定差异活性斑点基础上,组合各种色谱技术,分离纯化突变株新产抗肿瘤活性产物;根据理化性质和波谱数据鉴定化合物结构;采用MTT法测评抗肿瘤活性。结果链霉素对HLF-39和HLF-43的最低抑菌浓度分别为3和10mg·L-1。经抗性筛选,得到对链霉素产生抗性的HLF-39突变株28株、HLF-43突变株204株。在所得突变株中,3株HLF-39突变株和14株HLF-43突变株有抗肿瘤活性,100mg·L-1样品对K562细胞的抑制率大于20%;其中,4株分别对11、100、200和300mg·L-1链霉素产生抗性的HLF-43突变株CHS-21101、CHS-210010、CHS-220002和CHS-230001活性显著,100mg·L-1样品对K562细胞的抑制率分别达59.5%、50.0%、44.1%和59.6%。从CHS-21101发酵物中分离得到2个该突变株新产抗肿瘤活性产物,并分别鉴定为环(4-羟脯-亮)二肽(1)和phencomycin(2)。化合物1和2对K562细胞呈抑制活性,100mg·L-1抑制率分别为33.9%和21.4%。结论利用核糖体工程抗性筛选技术,从2株无活性放线菌野生菌株成功筛选得到17株具有抗肿瘤活性的链霉素抗性突变株,从其中1株发酵物中分离鉴定了2个该突变株新产抗肿瘤活性产物。用核糖体工程技术改造无活性放线菌野生株的次级代谢功能,可筛选获得活性突变株并提供深入研究新产活性产物,从中筛选新药及其先导结构,从而拓展药源放线菌活性菌株新资源。
对不起，您暂无在线预览权限，如需浏览请
立即登录热门商品
woshiliux***
擅长:
土建 装饰 园林 电气
- 4.7
服务
- 4
商品
- 256
人气
相关推荐
放线菌野生株代谢功能的核糖体工程改造与新产抗肿瘤活性产物研究 635KB
核糖体工程改造海绵共附生放线菌紫色素的特性 1.3MB
陆地与海洋来源放线菌次级代谢能力的核糖体工程改造 1.3MB
基因工程改造放线菌 91KB
放线菌天然产物糖基化改造研究进展 980KB
甲基营养菌代谢网络途径和代谢工程改造的研究进展 1.6MB
代谢工程改造大肠杆菌提高乙醇酸产率 1.7MB
九里香醇提物中抗肿瘤活性成分的研究 112KB
活性污泥中放线菌最适生长条件的实验研究 279KB
代谢工程改造大肠杆菌生产乳酸的研究进展 220KB